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神戸大学附属図書館デジタルアーカイブ 入力補助 English カテゴリ 学内刊行物 ランキング アクセスランキング ダウンロードランキング https://hdl.handle.net/20.500.14094/90006595 このアイテムのアクセス数:42件（2024-05-10 08:22 集計） 閲覧可能ファイル  ファイル フォーマット サイズ 閲覧回数 説明 90006595 (fulltext) pdf 2.70 MB 28 メタデータ ファイル出力 メタデータID 90006595 アクセス権 open access 出版タイプ Accepted Manuscript タイトル Novel strategy for anchorage position control of GPI-attached proteins in the yeast cell wall using different GPI-anchoring domains 著者 Inokuma, Kentaro ; Kurono, Hiroki ; den Haan, Riaan ; van Zyl, Willem Heber ; Hasunuma, Tomohisa ; Kondo, Akihiko 著者ID A1270 研究者ID 1000090532606 KUID https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=c0dc203b8c0d8986520e17560c007669 著者名 Inokuma, Kentaro 猪熊, 健太郎 イノクマ, ケンタロウ 所属機関名 科学技術イノベーション研究科 著者名 Kurono, Hiroki 著者名 den Haan, Riaan 著者名 van Zyl, Willem Heber 著者ID A0960 研究者ID 1000020529606 KUID https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=73b63639d47d0a4b520e17560c007669 著者名 Hasunuma, Tomohisa 蓮沼, 誠久 ハスヌマ, トモヒサ 所属機関名 先端バイオ工学研究センター 著者ID A1715 研究者ID 1000040205547 KUID https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=a324eb4a1b052e53520e17560c007669 著者名 Kondo, Akihiko 近藤, 昭彦 コンドウ, アキヒコ 所属機関名 科学技術イノベーション研究科 収録物名 Metabolic Engineering 巻(号) 57 ページ 110-117 出版者 Elsevier 刊行日 2020-01 公開日 2021-01-01 抄録 The yeast cell surface provides space to display functional proteins. Heterologous proteins can be covalently anchored to the yeast cell wall by fusing them with the anchoring domain of glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored cell wall proteins (GPI-CWPs). In the yeast cell-surface display system, the anchorage position of the target protein in the cell wall is an important factor that maximizes the capabilities of engineered yeast cells because the yeast cell wall consists of a 100- to 200-nm-thick microfibrillar array of glucan chains. However, knowledge is limited regarding the anchorage position of GPI-attached proteins in the yeast cell wall. Here, we report a comparative study on the effect of GPI-anchoring domain–heterologous protein fusions on yeast cell wall localization. GPI-anchoring domains derived from well-characterized GPI-CWPs, namely Sed1p and Sag1p, were used for the cell-surface display of heterologous proteins in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Immunoelectron-microscopic analysis of enhanced green fluorescent protein (eGFP)-displaying cells revealed that the anchorage position of the GPI-attached protein in the cell wall could be controlled by changing the fused anchoring domain. eGFP fused with the Sed1-anchoring domain predominantly localized to the external surface of the cell wall, whereas the anchorage position of eGFP fused with the Sag1-anchoring domain was mainly inside the cell wall. We also demonstrate the application of the anchorage position control technique to improve the cellulolytic ability of cellulase-displaying yeast. The ethanol titer during the simultaneous saccharification and fermentation of hydrothermally-processed rice straw was improved by 30% after repositioning the exo- and endo-cellulases using Sed1- and Sag1-anchor domains. This novel anchorage position control strategy will enable the efficient utilization of the cell wall space in various fields of yeast cell-surface display technology. キーワード Yeast surface display Glycosylphosphatidylinositol-anchored cell wall protein Anchorage position Sed1p Sag1p カテゴリ 科学技術イノベーション研究科 先端バイオ工学研究センター 学術雑誌論文 権利 © 2020 Elsevier. This manuscript version is made available under the CC-BY-NC-ND 4.0 license http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ 詳細を表示  資源タイプ journal article 言語 English (英語) ISSN 1096-7176　OPACで所蔵を検索　CiNiiで学外所蔵を検索 NCID AA11589605　OPACで所蔵を検索　CiNiiで表示 関連情報 DOI https://doi.org/10.1016/j.ymben.2019.11.004 URI https://www.kobe-u.ac.jp/research_at_kobe/NEWS/news/2019_12_09_01.html NAID 120006775932　CiNiiで表示 ホームへ戻る お問い合わせ Kernel通信 附属図書館 Copyright © Kobe University Library All rights reserved.